一种蛋白质N-端富集方法及其应用-国家洁净能源知识产权运营中心

专利号	CN201410747402.8	申请日	2014/12/9
公开（公告）号	CN105738169B	授权公告日	2018/9/21
主分类号	G01N1/28	分类号	G01N1/28; G01N30/08
申请号	CN201410747402.8	专利类型	发明
发明（设计）人	张丽华; 陈玲凡; 单亦初; 杨开广; 张玉奎
申请（专利权）人	中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明涉及一种蛋白质N‑端富集方法，包括：选择性胍基化标记、磷酸根标记、磷酸根亲和材料富集。蛋白质样品首先采用碱性磷酸酶去除磷酸化翻译后修饰，然后在强碱性条件下对蛋白侧链氨基进行选择性的胍基化标记封闭侧链氨基，剩余的蛋白末端氨基采用带有磷酸根的氨基活性试剂进行标记使末端带上磷酸根标签，对标记的蛋白进行酶解，最后采用磷酸根亲和富集材料吸附带有磷酸根标签的N‑端肽段，从而得到蛋白质N‑端。本发明的优点是高效的胍基化、磷酸根标记和亲和材料富集，使得蛋白N端的富集具有优异的富集效率与选择性。