一种贴壁细胞中游离氨基酸和脂肪酸的提取及分析方法-国家洁净能源知识产权运营中心

专利号	CN201510024144.5	申请日	2015/1/16
公开（公告）号	CN105842364B	授权公告日	2018/6/29
主分类号	G01N30/06	分类号	G01N30/06
申请号	CN201510024144.5	专利类型	发明
发明（设计）人	耿柠波; 陈吉平; 张保琴; 张海军; 王菲迪
申请（专利权）人	中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明公开了一种贴壁细胞中游离氨基酸和脂肪酸组分的提取和分析方法，主要包括以下步骤，贴壁细胞于培养盘贴壁培养后，样品经快速水洗后液氮淬灭，加入少量水超声破碎，冻干后加入MTBE提取，然后加水离心取上清，氮气吹干后用乙腈定容然后对脂肪酸组分进行液相色谱质谱(LC‑MS)分析。提取剩余部分继续加入MTBE和甲醇提取，离心后取下层对氨基酸组分直接进行LC‑MS分析。本发明采用LC‑MS对游离氨基酸和脂肪酸组分进行分析，利用较少的样本量实现了氨基酸和脂肪酸组分的同时提取。与常规脂肪酸GC‑MS分析方法比较，该方法不需衍生，极大简化样品前处理过程，同时为贴壁细胞内代谢物的提取提供了一种参考方法，该分析方法能够应用于其他介质中游离氨基酸和脂肪酸的分析。