一种蛋白质定量方法-国家洁净能源知识产权运营中心

专利号	CN201310240443.3	申请日	2013/6/14
公开（公告）号	CN104237363B	授权公告日	2017/2/8
主分类号	G01N27/62	分类号	G01N27/62
申请号	CN201310240443.3	专利类型	发明
发明（设计）人	张丽华; 张珅; 吴琪; 周愿; 袁辉明; 杨开广; 张玉奎
申请（专利权）人	中国科学院大连化学物理研究所
摘要：本发明涉及一种使用pH选择性二甲基化标记和一级二级谱结合定量的蛋白质定量方法。包括：选择性二甲基化标记、使用mascot distiller软件对一级谱肽段定量、使用“force find”程序对二级谱肽段定量。蛋白质样品首先使用胰蛋白酶进行酶解；酶解产物先于酸性条件下在反相捕集柱上进行选择性的N 端氨基二甲基化标记；然后在碱性条件下在反相捕集柱上对肽段侧链氨基进行二甲基化标记；以精氨酸结尾的肽段使用mascot distiller进行定量；以赖氨酸结尾的肽段使用“force find”程序进行定量。本发明的优点是与传统的基于b, y离子的两端标记二级谱定量方法相比，其操作较为简单，标记效率高，标记选择性好，定量精密度、准确度、覆盖度高。